La thérapie génique est à la pointe de la médecine, avec de nouveaux produits passionnants en cours de développement et utilisé pour traiter une grande variété de maladies génétiques. Cependant, un obstacle majeur à la livraison de la thérapie génique rapidement est le processus de purification qui prend du temps.
Désormais, des chercheurs de l'Université d'Osaka ont signalé une nouvelle technique qui pourrait aider à accélérer ce processus: une nouvelle façon de détecter et de quantifier les composants du « système de livraison » pour les gènes thérapeutiques. L'œuvre, récemment publiée dans Chimie analytiquereprésente un progrès passionnant pour la thérapie génique.
Le virus adéno-associé recombinant (RAAV) est un vecteur prometteur pour fournir des gènes thérapeutiques aux patients souffrant de troubles génétiques. Les cellules sont d'abord conçues pour produire des particules virales qui contiennent le gène thérapeutique. Cependant, seules certaines de ces particules sont « pleines », c'est-à-dire contenant le gène thérapeutique, tandis que d'autres particules sont « vides » et ne le font pas. L'optimisation du rapport des particules complètes à vides est essentielle pour maximiser l'efficacité clinique.
« Une étape importante de contrôle de la qualité dans la production de ces vecteurs à base de RAAV consiste à déterminer le nombre de virus qui contiennent un génome complet et le nombre vide », explique l'auteur principal, Yuki Yamaguchi. « Bien que plusieurs méthodes puissent distinguer avec précision les particules pleines et vides une fois le virus purifié, c'est une étape longue qui ralentit la production. »
Le problème est que les protéines des cellules hôtes se mettent sur le chemin lorsque les chercheurs essaient de faire la distinction entre les particules pleines et vides. Ces protéines, trouvées dans le lysat cellulaire et le milieu conditionné, doivent être retirées, et c'est ce qui prend du temps.
Pour développer un moyen efficace de quantifier les particules pleines et vides, sans avoir besoin de purification, une technique appelée photométrie de masse a été utilisée. Cette technique détecte si les substances se lient à une surface en verre. L'étude a testé l'activité de liaison des particules virales pleines et vides dans les Raav, le lysat cellulaire et le milieu conditionné.
« Les résultats ont été très prometteurs », explique Susumu Uchiyama, auteur principal. « Nous avons constaté que les particules virales, qui fournissent la thérapie, étaient principalement non liées, tandis que la plupart des protéines de cellule hôte dans le lysat cellulaire et le milieu conditionné étaient liées. De cette façon, le photomètre de masse a pu distinguer les deux types de molécules d'une manière plus rapide et aussi précise que les méthodes conventionnelles. »
Étant donné que le rapport de particules complet à vide est une mesure clé de la qualité et de l'efficacité clinique de la thérapie génique à base de RAAV, cette nouvelle technique devrait améliorer la production de RAAV. La technique décrite ici devrait accélérer le processus de fabrication, avec des effets positifs pour les patients ayant besoin de thérapie génétique.
